基于细胞间连接探讨左归丸对先天肾虚仔鼠皮肤屏障发育的影响
Effect of Zuoguiwan on Development of Skin Barrier in Neonatal Rat Model of Congenital Kidney Deficiency Based on Intercellular Connections
摘要目的:研究左归丸对先天肾虚子代皮肤屏障发育的影响及其机制.方法:60只雌雄比例为2∶1的大鼠进行配对,随机分为空白组,先天肾虚组,左归丸低、高剂量组(2、8g·kg-1).除空白组孕鼠外,其余3组孕鼠采用慢性不可预知轻度应激直至仔鼠出生.空白组、先天肾虚组给予生理盐水灌胃,左归丸组自雌鼠妊娠第1天起予左归丸汤剂灌胃.取出生当天仔鼠血清,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测出生当天仔鼠血清白细胞介素-6(IL-6)含量,切取出生当天仔鼠背部同一位置全层皮肤,苏木素-伊红(HE)染色观察皮肤组织病理及皮肤厚度、毛囊计数,原位末端标记法(TUNEL)染色检测皮肤组织细胞凋亡情况,免疫组化及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮肤组织白细胞介素-6受体(IL-6R)、白细胞介素-17A(IL-17A)表达,免疫荧光及Western blot检测皮肤组织闭锁蛋白(Occludin)、缝隙连接蛋白43(Cx43)、胞质衔接蛋白-1(ZO-1)蛋白表达.结果:与空白组比较,先天肾虚组仔鼠血清IL-6含量显著升高(P<0.01),角质层厚度、皮肤厚度及毛囊数量均显著降低(P<0.01),皮肤组织IL-6R、IL-17A表达显著升高(P<0.01),凋亡细胞数量显著增多(P<0.01),Occludin、Cx43及ZO-1蛋白表达量明显降低(P<0.05);与先天肾虚组比较,左归丸低、高剂量组仔鼠血清IL-6含量均明显下降(P<0.05),左归丸低剂量组仔鼠皮肤毛囊数量明显增多(P<0.05),左归丸高剂量组仔鼠角质层显著增厚(P<0.01),毛囊数量显著增多(P<0.01),皮肤组织IL-6R、IL-17A表达明显降低(P<0.05,P<0.01);凋亡细胞数量明显减少(P<0.05,P<0.01),左归丸高剂量组仔鼠皮肤组织Occludin、Cx43及ZO-1蛋白表达量明显升高(P<0.05,P<0.01).结论:左归丸能够减少子代血清IL-6及皮肤组织IL-6R、IL-17A含量,并改善细胞间连接蛋白表达,从而改善先天肾虚所致子代皮肤屏障发育异常.
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