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芍药汤通过调控糖代谢重编程影响Th17/Treg细胞平衡治疗溃疡性结肠炎

Shaoyaotang Restores Th17/Treg Cell Balance by Regulating Glucose Metabolism Reprogramming in Treatment of Ulcerative Colitis

摘要目的:探讨通过调控糖代谢重编程影响辅助性T细胞17/调节性T淋巴细胞(Th17/Treg)细胞平衡在溃疡性结肠炎(UC)中的作用及芍药汤的干预机制.方法:采用硫酸钠葡聚糖(DSS)法构建溃疡性结肠炎小鼠模型.将48只C57BL/6小鼠随机分正常组、模型组、美沙拉嗪组、芍药汤组、抑制剂组2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)和抑制剂(2-DG)+芍药汤组,给药组分别予相应药物灌胃7 d,芍药汤给药量15.54 g·kg-1·d-1),美沙拉嗪给药量0.39g·kg-1·d-1,抑制剂组腹腔注射7 d,抑制剂给药量100 mg·kg-1·d-1.末次给药后24 h观察小鼠的一般状况及结肠损伤程度,免疫组化染色检测结肠组织白细胞介素(IL)-10、IL-17表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测结肠组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、乳酸脱氢同工酶(LDHA)、己酸脱氢同工酶2(HK2)相关水平表达,流式细胞术检测Th17/Treg细胞分化水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结肠组织中乳酸及葡萄糖水平及血清IL-10、IL-17、IL-6炎症因子表达.结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量下降明显,DAI评分降低(P<0.05);结肠组织HIF-1α、LDHA、HK2、IL-17、IL-6蛋白及Th17细胞、乳酸、葡萄糖表达升高(P<0.05),IL-10、Treg细胞表达降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠体质量上升,DAI评分升高(P<0.05),结肠组HIF-1α、LDHA、HK2、IL-17、IL-6蛋白及Th17细胞、乳酸、葡萄糖表达降低(P<0.05),IL-10、Treg细胞表达升高(P<0.05),以芍药汤+2-DG组作用最明显.结论:芍药汤可减轻UC小鼠腹泻、便血症状,其机制可能与通过调控糖代谢重编程,从而平衡Th17/Treg细胞比例有关,发挥治疗UC的作用.

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