摘要目的:该研究旨在通过华蟾素注射液(HCSI)引起的血管刺激反应,筛选引起该反应的物质基础并探讨其分子作用机制.方法:首先建立HCSI及其成分致兔血管刺激性反应模型,将16只清洁级雄性大耳白兔随机分成6组,包括空白组(2 只,生理盐水)、HCSI组(2 只,0.16 L·L-1)、多肽组(3 只,0.232 g·L-1)、核酸组(3 只,0.232 g·L-1)、色胺组(3 只,0.022 4 g·L-1)、毒配基组(3只,0.016 8 g·L-1),每日给药1次,连续造模3d;末次给药后24 h进行肉眼和病理观察并评分.后建立小鼠血管通透性增高模型,根据体质量将78只ICR小鼠分成13组,每组6只,包括空白组(生理盐水),阳性药组(组胺,20 mg·kg-1),HCSI高、低剂量组(12.8、3.2 mg·kg-1),5-羟色胺(5-HT)高、中、低剂量组(3、1.5、0.75 mg·kg-1),蟾毒色胺(BUF)高、中、低剂量组(3、1.5、0.75 mg·kg-1),蟾蜍特尼定(BTD)高、中、低剂量组(3、1.5、0.75 mg·kg-1);观察给药后30 min内小鼠的耳廓蓝染情况,采用吸光度法(酶标仪)检测小鼠耳组织伊文思蓝(EB)渗出,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化(p)-p38MAPK、核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白(IκB)、p-IκB、IκB激酶(IKK)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)蛋白表达,数字聚合酶链式反应(Digital PCR)检测耳组织和肺组织NF-κB、NF-κB p65 mRNA表达.结果:兔模型肉眼观察和病理检查显示,HCSI组有明显血管刺激作用,色胺组有轻度血管刺激作用,而核酸组、多肽类和毒配基组未见明显的血管及其周围组织刺激表现和病变,提示色胺类成分可能是HCSI的主要血管刺激物质.HCSI高剂量组,5-HT、BUF、BTD高剂量组均可使小鼠耳蓝染反应率、耳蓝染评分及EB渗出较空白组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),且反应程度与剂量正相关.HCSI高剂量组及BUF高剂量组能显著增加小鼠血管刺激性反应模型的TNF-α和IL-6含量(P＜0.01),提升p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-IκB/IκB及IKK蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01),促进NF-κB 和NF-κBp65 mRNA表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:p38 MAPK信号通路及NF-κB分子参与了 HCSI及BUF引起的小鼠血管通透性增高及血管刺激性反应,吲哚类成分BUF可能是HCSI引起血管刺激性反应的重要物质.