摘要目的:研究茵陈蒿汤与茵陈术附汤合方(清温并用法)对乙肝相关性慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者体外培养的调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)表达的调控作用.方法:采集HBV-ACLF患者新鲜外周血并分离单个核细胞(PBMC),通过免疫磁珠法分离原代Treg及Naive CD4+T细胞,体外扩增后诱导Naive CD4+T分化为Th17细胞,制备清法(茵陈蒿汤)、温法(茵陈术附汤)、清温并用法(茵陈蒿汤与茵陈术附汤合方,即温阳解毒化瘀方)含药血浆及空白大鼠血浆(生理盐水),设置空白组、清法组(5.04 g·kg-1)、温法组(6.21 g·kg-1)、清温并用法组(17.1 g·kg-1),各组细胞分别给予相应血浆处理.采用流式细胞术检测Treg/Th17细胞频数,采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测转化生长因子-β(TGF-β)表达水平,流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)检测白细胞介素(IL)-10、IL-17A、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-23表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测叉头框蛋白P3(FoxP3)、维甲酸相关孤核受体-γt(ROR-γt)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测FoxP3、ROR-γt蛋白表达.结果:经过清法、温法、清温并用法含药血浆干预后,与空白组比较,清温并用法组Treg、Th17细胞频率下降,Treg细胞因子TGF-β、IL-10及Th17细胞因子TNF-α、IL-17A、IL-23显著下降,FoxP3、ROR-γt mRNA表达和蛋白表达显著下降(P＜0.01);与清法组比较,清温并用法组Treg细胞频率、FoxP3 mRNA表达和蛋白表达下降,但差异均无统计学意义,Th17细胞频率,Treg细胞因子TGF-β、IL-10,以及Th17细胞因子TNF-α、IL-17A、IL-23下降,ROR-γtmRNA表达和蛋白表达明显下降(P＜0.05,P＜0.01);与温法组比较,清温并用法组Treg细胞频率、FoxP3 mRNA表达和蛋白表达下降,但差异均无统计学意义,Th17细胞频率、Treg细胞因子TGF-β、IL-10、及Th17细胞因子TNF-α、IL-17A、IL-23下降,ROR-γtmRNA表达和蛋白表达明显下降(P＜0.05).结论:清温并用法可下调Treg、Th17细胞特异性转录因子表达,抑制Treg、Th17细胞过度活化,减少细胞因子TGF-β、IL-10、TNF-α、IL-17A、IL-23分泌,从而起到减轻肝衰竭炎症反应,改善患者预后的作用.