摘要目的:探究活血荣络方(HXRLP)对缺血性脑卒中(IS)后血脑屏障(BBB)修复的作用机制.方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术(Sham)组,脑梗死模型(MCAO)组,昼夜节律紊乱合并脑梗死模型(ECD-MCAO)组,活血荣络方低、中、高剂量(HXRLP-L、M、H)组(8.5、17、34 g·kg-1·d-1)、阳性药丁苯酞(NBP)组(0.23 mL·d-1),Sham组仅分离暴露血管,但不插入线栓,其余各组制备小鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,ECD-MCAO组、HXRLP各剂量组、NBP组制备环境生物节律紊乱(ECD)模型,Sham组、MCAO组、ECD-MCAO组小鼠予以等体积大豆油灌胃,其他各组给予对应药物灌胃,各组连续给药7 d后取材.采用mNSS评分评估HXRLP对IS后神经系统缺损的修复作用;通过苏木素-伊红(HE)染色评估HXRLP对IS后脑组织病理学损伤的影响;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、脑血流灌注状态评估HXRLP对IS后脑组织损害的修复作用;伊文思蓝染色、透射电镜评估HXRLP对IS后BBB通透性损伤的改善作用;免疫荧光(IF)染色观察脑组织内血管性血友病因子(vWF)、脑和肌肉芳烃受体核转录因子样蛋白-1(Bmal1)及闭锁蛋白(Occludin)表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bmal1、Occludin、紧密连接蛋白(Claudin-5)及血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素(Ang)的蛋白表达并相关分析.结果:与Sham组比较,MCAO组神经功能缺损、脑梗死体积、脑病理损伤、BBB渗漏显著加重(P＜0.01),脑血流灌注显著减少(P＜0.01),脑组织内 Bmal1、vWF、VEGFA、Ang表达显著增强(P＜0.01),Occludin、Claudin-5表达显著减弱(P＜0.01);与 MCAO组比较,ECD-MCAO组神经功能缺损、脑梗死体积、BBB渗漏均显著加重(P＜0.01),脑病理损伤明显加重(P＜0.05),脑血流灌注显著减少(P＜0.01),脑组织内 Bmal1、vWF、VEGFA、Ang、Occludin、Claudin-5 表达均显著下降(P＜0.01);与 ECD-MCAO 组比较,HXRLP各剂量组对神经功能缺损、脑梗死体积、脑病理损伤、BBB渗漏均显著改善(P＜0.01),显著增加脑血流灌注(P＜0.01)及增强脑组织内Bmal1、vWF、VEGFA、Ang、Occludin、Claudin-5表达水平(P＜0.01).结论:HXRLP可调控生物钟蛋白Bmal1,促进 VEGFA、Ang、Occludin、Claudin-5表达,从而改善 IS后 BBB损伤.