摘要目的:探讨疏风解毒胶囊(SFJD)缓解甲型H1N1流感病毒性肺炎的可能机制,重点关注其对呼吸道上皮细胞中Toll样受体(TLR)信号通路的影响.方法:采用甲型流感病毒A/PR/8/34(PR8)株感染小鼠建立病毒性肺炎模型.将小鼠随机分为正常组、PR8感染(PR8)组、SFJD组(8.4g·kg-1),每组10只.感染当天为第1天,SFJD组以20mL·kg-1的体积每天进行灌胃,正常组和PR8组给予等体积去离子水.于第5天进行显微计算机断层扫描(Micro-CT),并解剖取小鼠肺,计算肺指数,以验证药效;通过单细胞测序分析呼吸道上皮细胞的差异表达基因;采用多重荧光免疫组化法检测上皮细胞黏附分子(EpCAM)阳性细胞中TLR、肿瘤坏死因子受体关联因子6(TRAF6)和髓样分化因子88(MyD88)蛋白的表达,计算表达TLR通路蛋白的呼吸道上皮细胞比例;用流式分选法分选呼吸道上皮细胞;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测分选出的上皮细胞中TLR、MyD88、TRAF6、含Toll-白细胞介素受体结构域的诱导型β干扰素适应因子(TRIF)、核转录因子-κB抑制因子激酶α(IKKα)和核转录因子-κB(NF-κB)表达;通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肺组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:在转录组水平,SFJD能够逆转呼吸道上皮细胞中TLR信号通路基因的表达趋势,下调多个TLR信号通路相关基因(P＜0.01).在蛋白水平,SFJD明显降低了肺组织中表达TLR3的呼吸道上皮细胞比例(P＜0.05),明显降低了上皮细胞 TLR2、TLR3、TLR4、TRIF、TRAF6、IKKα、NF-κB 表达量(P＜0.05,P＜0.01),以及肺组织中促炎性细胞因子 IL-1β 和 TNF-α的水平(P＜0.01).结论:SFJD能够抑制呼吸道上皮细胞TLR及其下游信号级联反应,可能是其缓解病毒性肺炎的机制之一.