摘要目的:该研究旨在探讨消癥止痛外用方(XZP)对骨癌痛(BCP)的影响及作用机制.方法:30只BALB/c雌鼠随机分为假手术(Sham)组、BCP组、BCP+XZP低剂量组、BCP+XZP高剂量组及BCP+XZP高剂量+蛋白酶激活受体2(PAR2)激动剂(GB-110)组,通过将Lewis肺癌细胞注射于小鼠右侧股腔内建立BCP小鼠模型,给予XZP治疗,共21 d.21 d后处死小鼠进行取材,尼氏染色评估脊髓神经元存活情况;免疫荧光染色(IF)定位脊髓组织中的离子钙结合适配器分子1(Iba1)和神经元核抗原(NeuN),评估脊髓小胶质细胞活化和神经元存活情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测脊髓组织中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小胶质细胞M1/M2型极化相关mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脊髓小胶质细胞极化相关蛋白表达及脊髓组织中PAR2/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白的表达.结果:与Sham组比较,BCP组小鼠脊髓神经元损伤,脊髓组织尼氏阳性脊髓神经元显著减少(P＜0.01),NeuN阳性细胞率显著降低(P＜0.01);脊髓小胶质细胞被激活且增强脊髓组织炎症水平,Iba1染色显著增强(P＜0.01),IL-1β、TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-4 和 IL-10 的水平显著升高(P＜0.01);IL-1β、TNF-α 和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达显著升高(P＜0.01);且BCP小鼠脊髓组织中PAR2、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和NF-κB p65蛋白的表达显著增强(P＜0.01).与BCP组比较,高剂量的XZP治疗则显著增加了BCP小鼠尼氏阳性脊髓神经元的数量(P＜0.01);显著提高脊髓组织中的NeuN阳性细胞率,且显著削弱了Iba1染色(P＜0.01),IL-1β、TNF-α和IL-6水平明显降低,但TGF-β、IL-4和IL-10水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),IL-1β、TNF-α和iNOS的mRNA表达降低,但甘露糖受体(CD206)、精氨酸酶-1(Arg-1)和几丁质酶样蛋白1/2(YM1/2)的mRNA表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01);低剂量和高剂量的XZP治疗均明显降低了脊髓组织中PAR2、NLRP3、ASC和NF-κB p65蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01).而上述作用可被PAR2激动剂GB-110治疗明显消除.结论:XZP能减轻小鼠的BCP,XZP对BCP的治疗作用可能是通过阻断激活的PAR2/NF-κB/NLRP3信号通路的表达.