摘要目的:探讨消癥止痛外用方(XZP)缓解骨癌痛(BCP)的作用机制.方法:以Lewis肿瘤细胞建立小鼠BCP模型,观察XZP、铁死亡抑制剂-1(Fer-1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(Bru)对BCP的治疗作用,随机分为假手术(Sham)组、BCP组、BCP+XZP-L组、BCP+XZP-H组、BCP+Fer-1组、BCP+XZP-H+Bru组,每组6只小鼠;对小鼠进行疼痛行为学测试以评估疼痛程度;比色法检测血清和脊髓组织中铁死亡相关因子铁、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD);免疫荧光染色观察脊髓组织活性氧(ROS)产生情况;透射电镜观察脊髓组织线粒体的超微结构;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠脊髓组织Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脊髓组织Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11的蛋白表达.结果:与Sham组比较,BCP组小鼠肢体使用评分、足部机械戒断阈值和热缩足阈值均显著降低(P＜0.01),血清及脊髓组织铁、MDA、ROS水平明显升高(P＜0.05),SOD水平明显降低(P＜0.05),脊髓线粒体结构损伤,且Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11的mRNA及蛋白表达均显著下调(P＜0.01);与BCP组比较,XZP低、高剂量组均可改善上述疼痛行为学指标(P＜0.05,P＜0.01),降低铁死亡相关指标铁、MDA、ROS水平(P＜0.05),升高SOD水平(P＜0.05,P＜0.01),减轻线粒体损伤,并上调Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11的mRNA及蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).XZP高剂量组在缓解疼痛及抑制铁死亡方面,作用Fer-1效果相当.使用Bru后,XZP对疼痛行为学指标的改善作用、铁死亡相关指标的调节作用、线粒体结构的保护作用及Nrf2/HO-1/GPX4/SLC7A11通路的激活作用均被明显逆转(P＜0.05,P＜0.01).结论:外用XZP通过激活Nrf2/HO-1/GPX4/SLC7A11通路抑制脊髓神经元铁死亡和神经元损伤,减轻BCP小鼠疼痛症状.