摘要目的:研究淫羊藿苷对运动性疲劳影响小鼠精子发生过程的作用并探讨有关的机制.方法:将ICR雄性小鼠进行游泳筛选并随机分为正常组,模型组,维生素C组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,淫羊藿苷中剂量+N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组,每组10只.除正常组外各组通过负重游泳训练建立运动性疲劳模型.负重训练前2周不进行灌胃处理,第3～4周淫羊藿苷低、中、高剂量组分别给予0.03、0.06、0.12 g·kg-1淫羊藿苷灌胃,维生素C组给予0.2g·kg-1维生素C灌胃,Z-NAME组给予0.06 g·kg-1淫羊藿苷灌胃和0.01 g·kg-1 L-NAMA腹腔注射,正常组和模型组灌服等量的生理盐水.实验结束后,记录各组小鼠体质量、末次力竭游泳时间;试剂盒检测各组小鼠血清尿素氮(BUN)、乳酸(LA)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、睾丸睾酮(T)、睾丸Ca2+/Mg2+-ATP酶(微量法)、睾丸环磷酸鸟苷(cGMP)水平和流式细胞术检测精子CD46水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察睾丸生精小管并进行睾丸生精功能评分(TMS)评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测睾丸调钙质(RGN,SMP30)、环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶1(PKG)、环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶锚定蛋白(GKAP1)的蛋白表达;免疫荧光法(IF)检测睾丸Regucalcin的表达;显微镜下观察小鼠附睾精子质量;免疫组化(IHC)观察睾丸生精小管视黄酸刺激8(STRA8)、突触复合体蛋白3(SCP3)、过渡蛋白1(TNP1)荧光染色切片.结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量下降、游泳力竭时间显著降低(P＜0.01),疲劳标志物LA、LDH、BUN和脂质过氧化产物MDA水平显著升高(P＜0.01),睾丸组织RGN、PKG、GKAP1、睾酮、Ca2+/Mg2+-ATP酶、cGMP水平显著下降(P＜0.01),精子活力降低、精子数量减少、TMS评分下降,STRA8、SCP3、TNP1表达减少;与模型组比较,淫羊藿苷高剂量组游泳力竭时间显著增加(P＜0.01),LA、LDH、BUN、MDA水平显著下降(P＜0.01),SOD 水平显著升高(P＜0.01),睾丸组织 RGN、PKG、GKAP1、睾酮、Ca2+/Mg2+-ATP 酶、cGMP 水平显著升高(P＜0.01),精子活力升高、精子数量增加、TMS评分上升,STRA8、SCP3、TNP1表达增多;与L-NAME组比较,淫羊藿苷中剂量组睾丸组织STRA8、SCP3、TNP1表达显著增加(P＜0.01),cGMP、GKAP1水平显著升高(P＜0.01).结论:运动性疲劳使得小鼠RGN和cGMP/PKG/GKAP1信号通路蛋白表达减少,并经由这一途径导致小鼠精子发生出现异常,影响生殖功能;淫羊藿苷通过促进RGN和cGMP/PKG/GKAP1信号通路蛋白表达进而改善运动性疲劳小鼠精子发生障碍,缓解运动性疲劳对生殖系统的损伤.