换一批乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定因子的初步研究
PRELIMINARY STUDY ON GENETIC INSTABILITY OF JAPANESES ENCEPHALITIS VIRUS CDNACLONE TRANSFORMED IN ESCHERICHIA COLI
摘要为了探求乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定遗传的影响因子，本研究以猪源JEV HEN0701株基因组片段1~2913 bp为研究对象，分析基因组原核启动子和相关毒力基因在不稳定遗传中的作用。在5'端，分析片段中潜在的原核启动子序列，通过PCR扩增得到不同长度的cDNA片段；在3'端，通过内切酶酶切截断基因组prM蛋白或E蛋白编码区，获得3'末端不同的cDNA片段。将各片段克隆入pCR-BluntII-TOPO载体，转化大肠杆菌，于37℃条件下培养。结果显示，片段73~2913 bp、97~2913 bp、355~2913 bp及1~933 bp、1~1275 bp能够在转化菌中稳定遗传；含有其他片段39~2913 bp、54~2913 bp及1~1800 bp、1~1971 bp的重组细菌不能在37℃条件下生长；片段1~1600 bp虽然能够在转化菌中传代，但是出现不规律突变。以上结果表明：软件所预测各原核启动子片段中，基因组73~118 bp区域与cDNA克隆稳定性有关，且上游的54 bp至73 bp的序列对该区域启动子存在影响；在JEV基因组1275 bp至1600 bp之间可能存在毒性蛋白编码序列。
更多相关知识
关键词
乙型脑炎病毒遗传不稳定性潜在启动子毒性蛋白编码序列位置Japanese encephalitis virus (JEV)genetic instabilitypotential prokaryotic promotertoxic protein coding sequence position
分类号
S852.659.6
发布时间
2014-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
- 浏览1
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
