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幼虫芽孢杆菌和蜂房蜜蜂球菌双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

DEVELOPMENT OF DUPLEX TAQMAN REAL-TIME PCR ASSAY FOR DETECTION OF PAENIBACILLUS LARVAE AND MELISSOCOCCUS PLUTON OF HONEY BEES

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摘要为快速鉴别诊断蜜蜂美洲幼虫腐臭病(American foulbrood,AFB)和欧洲幼虫腐臭病(European foulbrood,EFB),本研究根据GenBank中登录的幼虫芽孢杆菌(Paenibacillus larvae )和蜂房蜜蜂球菌(Melissiciccus pluton)16S rRNA基因序列分别设计特异性引物和探针,建立了双重TaqMan荧光定量PCR检测方法.结果表明,该方法与其他病原无交叉反应;对P.larvae和M.pluton的检测灵敏度均达10 copies/μL的阳性质粒;重复性试验结果显示批内、批间变异系数均小于2%.应用该方法对200份实验室模拟样品和200份临床样品进行了检测,与预期结果一致.本研究建立的方法可用于AFB与EFB的快速鉴别诊断和早期监测,以及蜂产品中P.larvae和M.pluton的定量分析.

作者何晓杰 ^[1] 王科珂 ^[2] 叶尔保勒 ^[3] 阿斯喀 ^[3] 张婕妤 ^[4] 哈森 ^[3] 季新成 ^[2] 王振宝 ^[5] 学术成果认领

作者单位伊犁职业技术学院,伊宁,835000 ^[1] 新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063 ^[2] 伊犁出入境检验检疫局,伊宁,835000 ^[3] 重庆工商大学,重庆,400067 ^[4] 伊犁职业技术学院,伊宁835000;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐830063;伊犁出入境检验检疫局,伊宁 835000 ^[5]

关键词美洲幼虫腐臭病幼虫芽孢杆菌欧洲幼虫腐臭病蜂房蜜蜂球菌双重TaqMan荧光定量PCR American foulbrood Paenibacillus larvae European foulbrood Melissococcus pluton duplex TaqMan real-time PCR

分类号 S852.616 S852.611

栏目名称

细菌

发布时间 2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家质检总局科技计划项目（2012IK023）新疆维吾尔自治区自然科学基金（201318101-19）新疆维吾尔自治区自然科学基金（2016D01B059）国家质检总局科技计划项目（2016IK260）