RNaseⅢ RncS对单核细胞增生李斯特菌毒力的调控作用研究

REGULATION ROLES OF RNASEⅢ RNCS ON THE VIRULENCE OF LISTERIA MONOCYTOGENES

二维码有效期 120s

摘要核糖核酸酶RnaseⅢ是一种调控ncRNA水平的重要酶系.为了解核糖核酸酶RnaseⅢ RncS在单核细胞增生李斯特菌(LM)毒力中的调控作用,本研究在构建LM-△rncS基因缺失突变株的基础上,通过动物感染试验检测强毒株LM-SB5与缺失株LM-△rncS对昆明系小鼠的LD50、存活能力、脏器载菌量及病理组织学产生的影响;利用细胞侵染试验检测强毒株与缺失株对小鼠巨噬细胞RAW264.7的粘附率、侵袭率及其在胞内生存繁殖能力的影响,分析RnaseⅢ RncS对LM毒力的影响.结果显示,LM-SB5强毒株和LM-△rncS缺失株对昆明系小鼠的LD50、分别为105.60 CFU、106.90 CFU;与LM-SB5强毒株相比,LM-△rncS的LD50升高了1.30个对数数量级,小鼠的存活时间明显延长,表明毒力显著降低;第3～5 d肝脏、脾脏载菌量显著减少(P＜0.05),其中第4d差异极显著(P＜0.01);LM-△rncS缺失株对肝脏、脾脏、肾脏的病理损伤降低;LM-△rncS缺失株对RAW264.7细胞的粘附率和侵袭率均显著低于LM-SB5强毒株(P＜0.01),在2～6 h之间,LM-△rncS缺失株在细胞内的细菌量显著低于LM-SB5强毒株(P＜0.05),证实LM-△rncS在细胞内的生存增殖能力显著降低,提示rncS基因对LM毒力发挥有一定的调控作用.本研究为进一步揭示RnaseⅢ在LM毒力中的分子调控机制提供了科学依据.