换一批
换一批猪SIgA分泌片的表达及其多克隆抗体的制备
PROKARYOTIC EXPRESSION AND PREPARATION OF POLYCLONAL ANTIBODIES AGAINST SECRETORY COMPONENT OF PORCINE SIGA
摘要SIgA是评价黏膜免疫的重要指标,分泌片(SC)是SIgA的特有成分,为了更方便的获得大量的SIgA的分泌片,本研究应用RT-PCR方法扩增出SC基因片段,将SC基因片段克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经酶切和测序验证获得pGEX-4T-1-SC重组质粒;将获得的pGEX-4T-1-SC转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达重组蛋白rSC.重组蛋白rSC经鉴定和纯化后,按常规免疫程序制备多克隆抗体;利用Western blot对抗重组蛋白rSC的多克隆抗体进行鉴定.结果显示,该抗体能特异性识别猪初乳中的SIgA免疫球蛋白,而与猪初乳中的IgG不发生反应.因此,抗SC重组蛋白的多克隆抗体可以作为抗SIgA免疫球蛋白的特异性抗体,为进一步建立SIgA的检测方法及黏膜免疫的研究奠定基础.
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分类号
S852.42
栏目名称
发布时间
2020-05-21
基金项目
博士后科研(基金配套)项目经费（4000826）；
广东海大畜牧兽医研究院基于畜禽重要疫病诊断技术院士工作站（2017B090904029）；
猪重要疫病快速诊断试剂的研发及产业化（201804020006）
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