换一批
换一批伪狂犬病病毒gB和gE蛋白重组表达及抗体间接ELISA检测方法的建立
Expression of Recombinant gB and gE Proteins of Pseudorabies Virus and Development of Indirect ELISA Assay for Antibody Detection
摘要本研究利用PCR扩增伪狂犬病病毒(PRV)Bartha-K61株gB基因核心抗原区和闵A株gE基因核心抗原区,构建了重组质粒pET-32a-gB和pET-32a-gE,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导进行表达.SDS-PAGE分析表明,pET32a-gB蛋白分子量约为44 kDa,pET32a-gE蛋白分子量约为41 kDa.分别以gB和gE重组蛋白作为包被抗原,建立了PRV抗体间接ELISA检测方法.该方法中重组蛋白仅与PRV阳性血清发生特异性反应,检测敏感性可达到1:1600,批内重复性和批间重复性变异系数均小于10％.本研究建立的间接ELISA方法可用于PRV抗体的监测,鉴别疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,有利于猪伪狂犬病净化工作.
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分类号
S852.659.1
栏目名称
发布时间
2022-03-18
基金项目
国家重点研发计划（2016YFD0500707-7）；
山东省重点研发计划（2019GNC106074）；
山东省农业重大应用技术创新项目（NDGCC2016-22）；
内蒙古农业大学高层次人才引进项目（NDYB2018-2）；
内蒙古农业大学高层次人才引进项目
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