换一批K亚群禽白血病病毒CRISPR/Cas13a检测方法的建立及初步应用
Establishment and Preliminary Application of the CRISPR/Cas13a Detection Method for Avian Leukosis Virus Subgroup K
摘要为了快速、准确和简便地检测K亚群禽白血病病毒(ALV-K),本研究参照GenBank中ALV-K的gp85基因设计了特异的RPA引物和用于LwCas 13a反应系统的crRNA,通过优化反应条件建立了检测ALV-K的CRISPR/Cas 13a方法,并验证了该方法的特异性、敏感性和符合性.结果显示,该法对感染鸡的其他常见病毒的检测均为阴性,特异性良好无交叉反应;灵敏度为50 copies/μL;与PCR的检测结果有很好的符合性.本研究建立的CRISPR/Cas13a检测方法配合试纸条显色在1.5 h左右可对ALV-K进行快速的鉴别诊断,为该病的诊断及防控净化提供了强有力的技术支撑.
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