换一批摘要羊睾丸原代细胞的体外培养是探究牛羊病毒致病机理的重要材料,实际科研工作中常受困于此类细胞传代性差、性质不稳定等缺点.外源性导入人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)可以促使端粒酶活性的表达,延长细胞体外培养寿命是一种有效建立细胞永生化的方法.本试验中,通过RT-PCR获得hTERT.利用同源重组的技术,成功的构建了hTERT的真核表达质粒和慢病毒质粒.利用慢病毒表达系统,建立了稳转hTERT绵羊的睾丸细胞系.间接免疫荧光和蛋白免疫印迹试验研究结果均显示,hTERT基因已成功整合进入绵羊睾丸基因组中并稳定表达.第30代次的羊睾丸细胞生长较快,性状较稳定,表明已成功构建了具有永生化特性的绵羊睾丸细胞系,为草食动物病毒的相关研究提供重要的细胞模型.
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关键词
绵羊睾丸原代细胞人端粒酶逆转录酶基因hTERT永生化细胞系Sheepprimary testicle cellhuman telomerase catalytic subunithTERTimmortalized cell lines
分类号
S852.65
栏目名称
发布时间
2024-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
甘肃农业大学兽医学省级特色学科开放课题（GSAU-XKJS-2018-071）
中国农业科学院兰州兽医研究所基本科研业务费（1610312021008）
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