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首页 > 中国动物传染病学报 > 非洲猪瘟病毒pE248R蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

非洲猪瘟病毒pE248R蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

Prokaryotic Expression of African Swine Fever Virus pE248R Protein and Preparation of Polyclonal Antibodies

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摘要本研究利用PCR方法从非洲猪瘟病毒的灭活样品中扩增出747 bp的E248R基因全长序列,利用同源重组法构建原核表达质粒pCold Ⅰ-pE248R,经1 mmol/L的IPTG诱导1h后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的分子量约为32 kDa,利用纯化后得到pE248R重组蛋白作为免疫原经过4次免疫后制备鼠源抗pE248R多克隆抗体.利用该多克隆抗体检测实验室构建并拯救的已证明能够稳定表达ASFV pE248R蛋白的重组病毒rPRRSV-E248R,结果显示制备的抗pE248R的多克隆抗体能够与rPRRSV-E248R发生特异性结合反应,证明利用本试验中原核表达的pE248R蛋白制备的多克隆抗体具有抗pE248R蛋白的特异性,为进一步针对ASFV E248R基因建立快速,特异性的血清学检测方法奠定了基础,也为针对pE248R蛋白的功能性研究提供了研究基础.

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作者 杜楠楠 [1] 陈金霞 [1] 曹云雷 [1] 张宽 [1] 童武 [2] 李丽薇 [2] 赵冉 [3] 童光志 [2] 高飞 [2] 学术成果认领
作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241 [1] 中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009 [2] 厦门市动物疫病预防控制中心,厦门 361009 [3]
关键词 非洲猪瘟病毒E248R基因pE248R蛋白多克隆抗体African swine fever virusE248R genepE248R proteinpolyclonal antibody
分类号 S852.651
栏目名称
研究论文
发布时间 2024-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31941017） 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（Y2020YJ15） 广东省重点领域研发计划项目（2019B020211003）
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