针对非洲猪瘟病毒K205R基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

Development and Application of TaqMan Real-Time Quantitative PCR for Detection of African Swine Fever Virus K205R Gene

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摘要为了快速、准确检测非洲猪瘟病毒(African swin fever virus,ASFV),本文根据我国流行毒株ASFV SY18(GenBank ID:MH766894.1)已公布的K205R基因序列设计并合成特异性引物及探针,建立针对K205R基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法.经过特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测试验分析显示,本文建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法Ct值与标准品在1×1011～1×102 copies/μL范围内具有很好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-2.797,检测下限为102 copies/μL,与其他能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应.重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.53774%,重复性好.本方法适用于临床样品及本实验室构建的表达ASFV K205R基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测,对ASFV快速检测及ASF早期诊断有重要意义.

作者乔思娜 ^[1] 李丽薇 ^[2] 赵款 ^[3] 高飞 ^[2] 周艳君 ^[2] 姜一峰 ^[2] 童武 ^[2] 赵冉 ^[4] 童光志 ^[2] 李国新 ^[2] 董世山 ^[3] 学术成果认领

作者单位河北农业大学动物医学院,保定 071001;中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241 ^[1] 中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009 ^[2] 河北农业大学动物医学院,保定 071001 ^[3] 厦门市动物疫病预防控制中心,厦门 361009 ^[4]

关键词非洲猪瘟病毒(ASFV)K205R基因荧光定量PCR 检测方法 African swine fever virus K205R gene real-time quantitative PCR detection

分类号 S852.651

栏目名称 研究论文

发布时间 2024-09-03

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