换一批
换一批融合蛋白EMP-VP2在杆状病毒表达系统中的表达与免疫原性鉴定
Baculovirus Expression and Immunogenicity of Fusion Protein Emp-VP2 of Japanese Encephalitis Virus and Porcine Parvovirus
摘要日本脑炎病毒(JEV)和猪细小病毒(PPV)是引起猪繁殖障碍的2种重要病原体,严重影响养猪业经济效益.本研究将日本脑炎病毒E基因上的多个B细胞及T细胞抗原表位与猪细小病毒VP2基因进行融合表达,构建pFastBac Dual-EMP-VP2载体,转化到DH10Bac感受态细胞后,通过蓝白斑筛选成功构建了rBacmid EMP-VP2重组杆粒,并在昆虫细胞Sf9中成功拯救了重组杆状病毒,实现了EMP-VP2高效表达.SDS-PAGE和Western blot分析表明,表达产物分子量与预期相符,且可以和JEV及PPV阳性血清反应,表明重组EMP-VP2蛋白具有良好的免疫反应性.表达的蛋白可以通过亲和层析成功纯化,用纯化后的EMP-VP2蛋白免疫小鼠和豚鼠,可以分别激活小鼠和豚鼠JEV和PPV特异性体液免疫反应,证明EMP-VP2蛋白具有免疫原性,为后续JEV和PPV的防控以及二联亚单位疫苗的研发奠定了基础.
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关键词
日本脑炎病毒猪细小病毒杆状病毒表达系统免疫反应性免疫原性Japanese encephalitis virusPorcine parvovirusbaculovirus expression systemimmunoreactivityimmunogenicity
分类号
S859.797
栏目名称
发布时间
2025-02-28
基金项目
国家重点研发计划（2022YFD1800801）；
上海市科委农业领域项目（22N41900400）
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