换一批动物结核分枝杆菌复合群间接ELISA诊断方法的建立
Establishment of an Indirect ELISA Method for Diagnosing Mycobacterium tuberculosis Complex Groups in Animals
摘要本研究通过前期已构建好一些优势抗原的表达载体库,以生物信息学工具分析候选抗原的理化性质、二级结构、B细胞抗原表位,选择优势抗原,以纯化后的融合抗原ECX作为包被抗原,将HRP标记的Protein G作为酶标的二抗,成功建立了一种用于多动物结核分枝杆菌复合群间接ELISA诊断的方法.该方法适用于实验室样品批量检测,其敏感性为0.912,特异性为0.949.应用本研究建立的动物结核分枝杆菌间接ELISA法和商品化动物结核分枝杆菌夹心ELISA抗体检测试剂盒共检测犬、猫、野生动物、SPF实验动物血清共552份.其中间接ELISA方法共检出6份血清抗体阳性,阳性检出率为1.09％(6/552);商品化夹心法试剂盒共检出8份血清抗体阳性,阳性检出率为1.45％(8/552);两者之间阳性重合数为6份,阳性重合率为85.72％(6/7);阴性重合数为544份,阴性重合率为99.82％(544/545).结果表明,两种诊断方法的检测结果具有较高的一致性.本方法的建立,与国外商品化试剂盒比较,不但有望实现这类检测产品的国产替代,同时实现了一种方法对不同物种来源血清的快速检测.
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