换一批紧密连接蛋白OCLN影响马疱疹病毒1型复制的作用研究
Effect of Tight Junction Protein OCLN on Replication of Equine Herpesvirus Type 1
摘要为探索紧密连接蛋白OCLN对马疱疹病毒1型(EHV-1)复制的影响,本研究使用CRISPR/Cas9基因编辑技术与慢病毒介导构建OCLN基因稳定敲除和过表达的BHK-21细胞株,采用Western blot检测OCLN敲除和过表达后的蛋白表达情况;使用qPCR、Reed-Muench、Western blot法等检测EHV-1 DNA水平、蛋白表达量、病毒滴度及致细胞病变(CPE)情况等.结果显示:成功构建出OCLN基因敲除的BHK-21细胞株,可显著降低EHV-1 DNA含量、蛋白含量和病毒滴度,阻止EHV-1吸附和内化过程,减弱细胞变圆、脱落等CPE发生;OCLN蛋白过表达后显著增加EHV-1 DNA含量、蛋白含量和病毒滴度,加快EHV-1感染造成的CPE.综上所述,OCLN是EHV-1感染宿主的关键因子之一,在EHV-1感染靶细胞过程中起着重要作用,为建立抗EHV-1的药物作用靶标筛选提供重要的理论基础.
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