换一批伪狂犬病病毒gB蛋白纯化及单克隆抗体的制备
Preparation and Characterization of a Monoclonal Antibody Against gB Protein of Pseudorabies Virus
摘要本研究利用昆虫杆状病毒表达系统对伪狂犬病病毒(PRV)gB基因中富含抗原表位区段进行融合表达及纯化,并将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠以制备单克隆抗体(mAb).小鼠经3次免疫后,利用iELISA检测其血清中抗gB蛋白的抗体效价,并将抗体效价达到2 × 104以上的小鼠进行细胞融合.随后通过iELISA和IFA实验对阳性杂交瘤细胞进行筛选.经3～4次亚克隆筛选后,得到了 1株可以稳定分泌gB mAb的杂交瘤细胞株293.同时,对其进行亚类鉴定发现该株细胞分泌的抗体类型为IgM型.本研究为建立新型ELISA检测试剂盒、新型疫苗的开发,以及后续中和抗体的研究提供了良好的生物材料.
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