河南地区猫细小病毒RC-2021株的分离鉴定及其灭活后免疫效果研究
Isolation of Cat Parvovirus RC-2021 Strain in Henan Province and Its Immune Efficacy after Inactivation
摘要为探究河南地区猫细小病毒(FPV)的流行情况并对其流行毒株的遗传变异和演化规律进行分析,评估其灭活疫苗的免疫效果,本研究对采集的23份疑似由FPV引起的猫白细胞减少症的临床样品进行了PCR鉴定,并对其VP2基因进行同源性和遗传进化分析,同时获得对应样品的全基因序列.将鉴定为阳性的对应样品无菌接种于猫肾(CRFK)细胞并盲传3代进行病毒的分离和鉴定.利用分离到的病毒进行动物回归试验,并制备灭活疫苗免疫试验猫进行安全性和免疫原性评价.结果表明,从23份病料中检测到3份FPV阳性样品,接种了阳性样品的CRFK细胞出现明显的细胞病变,TCID50值为10-6.26/0.1 mL,透射电镜下观察到约20 nm的病毒粒子.分离株基因全长4442 bp,与下载的其他株病毒基因序列同源性为98.3%~99.8%,氨基酸序列比较保守,分离株病毒与中国哈尔滨分离的毒株FPV-XJ1亲缘关系比较接近.鉴定该毒株为强毒株,试验猫出现明显的临床症状,病理剖检病变明显,将病毒灭活制备疫苗后未导致免疫猫出现不良反应,免疫血清经1:200稀释后能够中和分离株病毒对CRFK细胞的感染,细胞形态完整.本研究成功分离了 1株猫细小病毒强毒株并制备了相应的灭活疫苗,丰富了国内FPV的流行病学资料和流行毒株信息,可用于评价疫苗的免疫效果,所制备的病毒灭活制品可有效预防猫泛白细胞减少症.
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