猫杯状病毒与猫疱疹病毒1型双重RT-qPCR检测方法的建立与应用
Development and Application of a Duplex RT-qPCR Assay for FCV and FHV-1
摘要为满足临床上对猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)与猫疱疹病毒1型(Feline herpesvirus type 1,FHV-1)双重检测需求,本研究基于荧光TaqMan技术,分别以FCV的ORF1基因和FHV-1的UL44基因为靶标,设计2对特异性引物和2条探针,构建了可同时检测该两种病毒的双重RT-qPCR方法,并对其性能及临床应用进行评价.结果显示:该方法特异性良好,仅能特异性检测FCV和FHV-1,与猫的其他常见病原体无交叉反应;对FCV和FHV-1的最低检测限分别达101 copies/μL和102 copies/μL;对样品检测组内与组间变异系数均小于2.5%;临床样品检测中,FCV与FHV-1的阳性检出率为71.7%和59.2%,与行业标准检测方法的结果符合率高达99.00%和98.70%.综上,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可作为临床高效检测FCV与FHV-1的可靠技术手段.
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