基于重组酶聚合酶扩增技术的貉源细小病毒现场快速检测技术研发
Rapid on-site Detection Method for Raccoon Dog Origin Parvovirus Based on Recombinase Polymerase Amplification Technology
摘要伴随城市化进程的高速推进,上海市居民区内栖息的野生貉数量持续增长,其携带的貉源细小病毒流行率与致死率较高,严重威胁种群健康,存在引发国家二级保护动物貉生态保护损失的风险,亟需持续监测其流行特征.传统基于PCR的检测技术存在周期冗长与设备依赖性双重局限,难以支撑野生动物疫源疫病监测中"早发现、早处置"的时效性防控需求.因此,本研究旨在针对貉源细小病毒现场快速检测需求,突破传统PCR技术检测周期与设备依赖的瓶颈,创新性耦合重组酶聚合酶扩增与侧流免疫层析技术,建立现场快速检测平台.经验证,该检测平台能够在无需使用PCR仪等大型仪器的条件下,在50 min内实现貉源细小病毒的现场快速检测,且与狂犬病毒、新冠病毒、犬瘟热病毒等犬科动物常见病原无交叉反应,视觉检测限为3 copies/μL,针对30份实际样本的检测灵敏度与特异度分别为100%与93%.研究结果表明,所研发的现场快速检测平台适用于野外现场环境,为貉源细小病毒的即时筛查提供高效工具,同时为野生动物疫源疫病监测网络的构建提供有力的技术支撑.
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