换一批猫源TMED10蛋白过表达稳转细胞株的构建及其应用
Construction and Application of a Feline-derived Transfection Cell Line to Stably Overexpress TMED10
摘要旨在建立猫源TMED10蛋白过表达稳转细胞株(CRFK-TMED10),为猫传染性腹膜炎病毒(Feline infectious peritonitis virus,FIPV)体外增殖,研究其感染机制提供重要工具.首先,通过特异性PCR,从猫肠道组织cDNA文库中,获得猫源TMED10基因编码序列,并进行生物信息分析,发现猫源TMED10为双跨膜的亲水性蛋白,具有分泌信号肽,与牛源TMED10亲缘关系最近.其次,利用3质粒慢病毒包装系统构建含猫源TMED10基因的重组慢病毒,感染猫肾上皮细胞(crandell-rees feline kidney,CRFK),并通过杀稻瘟菌素进行加压筛选,随后利用Western blot、IFA对阳性细胞进行鉴定,最终获得稳定过表达猫源TMED10蛋白的CRFK-TMED10细胞系.此外,研究发现FIPV SH2021毒株在该细胞系中的增殖能力显著提高.本研究为后续探索TMED10促进FIPV增殖的分子机制提供了重要工具.
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关键词
猫源TMED10慢病毒包装过表达细胞系猫传染性腹膜炎病毒Feline TMED10lentiviral packagingoverexpressionFeline infectious peritonitis virus
分类号
S852.65
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-6422.2026.01.018
发布时间
2026-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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