河北和山东部分地区猪圆环病毒2型的分离鉴定及其遗传变异分析
Isolation,Identification and Genetic Variation of PCV2 in Some Areas of Hebei and Shandong Provinces
摘要为了了解河北和山东省猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)的最新流行情况,有针对性地开展PCV2疫苗研究.对采集的61份疑似PCV2感染的组织通过PCR方式进行病原检测,并将PCV2单阳性样品接种于PK-15细胞分离病毒,通过PCR方法和间接免疫荧光法对分离毒株进行鉴定,对分离到的毒株进行全基因序列扩增、克隆和测序,测序后对全基因和ORF2基因进行遗传变异分析.结果显示61份样品中有32份为PCV2阳性,阳性率为52.4%.在PK-15细胞分离得到5株PCV2毒株,5株PCV2分离株基因组全长均为1767 bp.经与国内外30株各分型代表毒株比对及遗传进化树分析,确定5株分离株中1株为PCV2b型,4株为PCV2d型.Cap蛋白氨基酸序列分析发现,5株PCV2出现多位点突变且部分在抗原表位区.结果表明,PCV2在河北省的感染率依然较高,PCV2d是当前PCV2感染的优势基因型,本研究为PCV2分子流行病学研究提供了新的数据信息,为PCV2疫苗研究和PCV2的致病机制等研究提供了物质基础.
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