换一批
换一批CELO病毒fiber1基因部分片段的原核表达及抗原性鉴定
Cloning and expression of protein fiber1 gene of chicken embryo lethal orphan virus and identification of expressed protein antigenicity
摘要根据鸡胚致死孤儿(CELO)病毒Phelps株的fiber1基因(GenBank序列号U46933)序列设计了1对引物,采用PCR扩增CELO病毒fiber1基因C端(包含Knob-s区)的部分片段,并将其克隆到质粒表达载体pGEX-6p-1,获得的阳性克隆命名为pGEX-AF807.序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列与CELO病毒Phelps株的fiber1基因序列完全一致.将pGEX-AF807转化大肠埃希氏菌DH5α,经37 ℃、0.6 mmol/L IPTG诱导表达5 h,SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀.结果显示,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.6 ku,目的蛋白量占菌体总蛋白的35.7%.用CELO病毒多克隆血清做Western blotting试验,结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性.
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分类号
S852.659.1
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1673-4696.2005.06.013
发布时间
2005-07-28
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)（2003AA213020）
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