换一批PCV2 ORF2基因在大肠杆菌中的表达及ELISA检测方法的建立
Expression of ORF2 gene of porcine circovirus type 2 in Escherichia coli and establishment of an ELISA
摘要采用PCR扩增了猪圆环病毒Ⅱ型广东分离株的ORF2 3'端基因,将其连接到pET32a(+)质粒上并转化DH5a细胞,重组质粒经PCR和酶切鉴定并测序后,转化BL21菌,用1 mmol/L IPTG诱导表达重组菌.经sDS-PAGE和Western-blot分析,表明ORF2基因已在大肠杆菌中正确表达,表达的融合蛋白的分子质量约为33 ku;表达产物经超声波处理后,用Ni-NTA柱纯化,复性,用此纯化产物包被酶标板,建立了ELISA诊断方法,经对临床516份血清样品进行检测,结果表明仔猪的血清阳性率为35.2%,育肥猪的血清阳性率为60.6%,种猪的血清阳性率为69.8%.
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1673-4696.2008.08.011
发布时间
2008-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家科技重大专项（2004A20403002a）
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