摘要目的 探索一种纯度高、数量大、操作简便的大鼠原代成骨细胞培养方法,为后续的实验研究奠定基础.方法 2009年3-9月在中国科学院金属研究所生物实验室,选择出生24h内的大鼠胎鼠4只,摘取颅骨,采用胰蛋白酶和Ⅰ型胶原酶交替消化分离成骨细胞并进行传代培养.相差显微镜下观察原代培养的成骨细胞形态;并采用碱性磷酸酶(ALP)染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色及茜素红染色对培养的细胞进行鉴定.结果 该方法培养出的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,ALP染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色及茜素红染色均表现为阳性.结论 酶交替消化法原代培养胎鼠成骨细胞,获得的成骨细胞纯度高、数量大,可作为一种相对可靠、有效的原代成骨细胞培养方法.
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