表达Omp31基因重组牛布鲁菌的构建及鉴定

Construction and identification of recombinant Brucella abortus expressing Omp31 gene

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摘要为提高布鲁菌疫苗株的免疫保护效果,本试验以牛布鲁菌疫苗株S19为研究对象,将羊布鲁菌Omp31基因克隆、扩增并插入至广宿主质粒pBBR1 MCS-2中,构建重组质粒pBBR1MCS-Omp31;通过电转化的方式转入S19感受态细胞中,经抗性基因筛选和PCR验证,获得重组牛布鲁菌S19-Omp31株;该重组菌株连续传25代未发现重组质粒和Omp31基因丢失,表明其遗传稳定性良好;进一步经SDS-PAGE检测可见约26 000相对分子质量的目的条带,采用Western blot法检测显示目的蛋白可与His单克隆抗体及Omp31蛋白高免血清反应.本研究构建的重组牛布鲁菌S19-Omp31株能够稳定表达目的基因,为进一步开展S19-Omp31株的免疫效果评价奠定基础.

作者梁佳茗 ^[1] 钱晶 ^[2] 卜昭阳 ^[3] 郎需龙 ^[3] 王莉 ^[1] 王秀然 ^[4] 杨艳玲 ^[5] 王晓旭 ^[5] 屈海龙 ^[3] 王兴龙 ^[1] 学术成果认领

作者单位吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130062;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130122 ^[1] 江苏省农业科学院兽医研究所,江苏南京,210014 ^[2] 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春,130122 ^[3] 吉林农业大学动物科技学院,吉林长春,130062 ^[4] 中国农业科学院特产研究所,吉林长春,130122 ^[5]

关键词牛布鲁菌 Omp31基因重组细菌活载体疫苗候选株

分类号 S852.61 R535

栏目名称 人兽共患病

DOI 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.02.12

发布时间 2019-05-05

基金项目

国家重点研发计划资助项目 国家自然科学基金青年科学基金资助项目