换一批携带荧光蛋白UnaG的口蹄疫病毒复制子系统的构建及其鉴定
Construction and identification of foot-and-mouth disease virus replicon system carrying fluorescent protein UnaG
摘要为构建携带荧光蛋白(UnaG)的口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)亚基因组复制子系统,本研究以FMDV全长cDNA质粒为模板,通过双酶切去除FMDV的部分结构蛋白和非结构蛋白,应用表达绿色荧光蛋白UnaG的报告基因序列替换FMDV的部分结构蛋白基因序列,成功构建FMDV-UnaG复制子.经PCR和测序验证后,将线性化的FMDV-UnaG复制子转染至表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞,并采用荧光显微镜和激光共聚焦技术观测荧光信号.结果表明,构建的FMDV-UnaG复制子能够有效表达UnaG蛋白且该蛋白与FMDV的3A蛋白存在共定位现象.此外,通过Western blot和RT-qPCR也分别检测到该复制子RNA可以表达病毒的非结构蛋白并且在BSR/T7细胞中能够进行自主复制.总之,FMDV-UnaG亚基因组复制子的成功构建为后续深入研究FM-DV的复制和翻译机制及发展疫苗载体等提供了有利工具.
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分类号
S855.3R535（寄生虫病）
栏目名称
DOI
10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.07.08
发布时间
2025-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
甘肃省自然科学基金资助项目（23JRRA551）
甘肃省自然科学基金资助项目（22JR5RA032）
博士后科学基金资助项目（2023M733819）
兰州市人才创新创业资助项目（2023-RC-3）
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