改进的RT-PCR检测PML/RARα融合基因快速诊断急性早幼粒细胞白血病
Improved RT-PCR for Detection of PML/RARα Fusion Gene in Rapid Diagnosis of Acute Promyelocytic Leukemia
摘要在急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞中迅速、准确检出PML/RARα融合基因对于及时应用全反式维甲酸(ATRA)或亚砷酸(As2O3)提高诱导缓解率、减轻出血导致的早期死亡至关重要,但目前临床上采用的嵌套式RT-PCR方法繁琐且费时,亟待改进以满足临床APL快速、准确诊断的需要.本研究采用TRIZOL快速提取高质量的细胞总RNA随机引物反转录,热启动单轮PCR,适当控制MgCl2及引物浓度和Taq醇用量,4条引物,3个体系,相同循环参数,对40例初诊APL患者骨髓标本同时扩增PML/RARα融合基因及内对照RARa.结果显示,40例APL患者标本均扩增出特异条带,非APL标本无特异扩增产物;阳性扩增片段清晰易辩、断裂点类型易于确定,检测可在6 小时内完成.结论:此改进的RT-PCR检测PML/RARa融合基因快速、特异、简便,完全满足临床对初诊APL诊断的需要.
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