换一批线粒体神经酰胺酶上调K562细胞Bcl-2蛋白表达水平
Mitochondrial Ceramidase Overexpression Up-regulates Bcl-2 Protein Level in K562 Cells,Probably Through Its Metabolite Sphingosine-1-phosphate
摘要最近,克隆了一种新的选择性定位于线粒体的神经酰胺酶,提示线粒体存在着神经酰胺代谢途径,可能对线粒体的功能,特别对凋亡产生影响.本研究将线粒体神经酰胺酶基因转染到K562细胞,以此了解线粒体神经酰胺酶的细胞生物学效应.以脂质体介导将含有线粒体神经酰胺酶cDNA的pcDNA3.1/His-CDase质粒转染到K562细胞,G418筛选阳性克隆,建立稳定表达线粒体神经酰胺酶的K562TC细胞株.用MTT法、annexin V/PI法、FCM及Western blot分别检测K562与K562TC细胞在细胞毒药物抗性、血清剥夺耐受性及Bcl-2蛋白表达水平方面的差异.结果表明:虽然K562TC与K562细胞对阿霉素、足叶乙甙及亚砷酸的敏感性没有差异,但是K562TC细胞Bcl-2蛋白水平明显升高,抗血清剥夺能力明显增强.以硫代反义寡核苷酸特异性封闭K562TC细胞线粒体神经酰胺酶,下调Bcl-2蛋白表达水平;二甲基鞘氨醇(鞘氨醇激酶抑制剂,降低细胞内1-磷酸鞘氨醇水平)同样下调K562TC细胞Bc1-2蛋白表达水平,而1-磷酸鞘氨醇明显上调K562细胞Bcl-2表达水平.结论:线粒体神经酰胺酶将线粒体神经酰胺代谢为鞘氨醇,进而在鞘氨醇激酶作用下生成1-磷酸鞘氨醇,此代谢途径上调K562细胞Bcl-2蛋白表达水平.
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关键词
K562细胞系K562TC细胞系线粒体神经酰胺酶1-磷酸鞘氨醇Bcl-2蛋白血清剥夺K562 cell lineK562TC cell linemitochondrial ceramidasesphingosine-1-phosphateBcl-2 proteinserum withdrawal
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DOI
10.3969/j.issn.1009-2137.2004.05.006
发布时间
2004-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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