换一批逆转录病毒载体转染的人凝血因子Ⅸ基因在人脐带组织源间充质干细胞中的表达
Expression of Human Factor Ⅸ in Retrovirus-transfected Human Umbilical Cord Tissue Derived Mesenchymal Stem Cells
摘要为了研究逆转录病毒(pLEGFP-N1)转染的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)基因在人脐带间充质干细胞中的表达,应用DNA重组技术将hFⅨ cDNA构建入pLEGFP-N1载体,转导入包装细胞系Pheonix细胞,应用病毒上清感染人脐带组织源间充质干细胞(hUCT-MSCs),经G418筛选10天后获得全部的转染阳性细胞,从蛋白质水平和其功能活性上检测hFⅨ的表达.结果显示:配养上清液中可检测到hFⅨ的表达,每24小时分泌量达2.68±0.36μg/106细胞.Western blot检测表明,转导hFⅨ的hUCT-MSCs能分泌预期分子大小的hFⅨ入上清.功能性凝集测定实验表明了转导FⅨ的hUCT-MSCs 2天培养上清中hFⅨ的活性为100%-130%.结论:pLEGFP-N1-hFⅨ能有效地转导hUCT-MSCs,并在其子代细胞中表达具有凝血活性的hFⅨ,这为hUCT-MSCs成为血友病B基因治疗的细胞载体研究奠定了基础.
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医学主题词
人(Persons)病毒(Viruses)脐带(Umbilical Cord)间质干细胞(Mesenchymal Stem Cells)血液凝固因子(Blood Coagulation Factors)
栏目名称
发布时间
2009-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中国科学与技术部863资助项目（(2006AA02al10)）
国家自然科学基金（(30570357和30600238)）
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