异硫氰酸苯乙酯对K562/A02细胞阿霉素耐药影响的研究

Effect of Phenylhexyl Isothiocyanate on Adriamycin Resistance of K562/A02 Cell Line

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摘要本实验研究探讨异硫氰酸苯乙酯(phenylhexyl isothiocyanate,PHI)对K562/A02细胞的阿霉素(ADM)耐药性与敏感性的影响,并研究其可能的相关机制.运用MTT法分别检测阿霉毒素(ADM)以及PHI+ADM对K562/A02细胞的生长抑制率,计算其耐药倍数;用流式细胞仪检测PHI作用前后细胞的凋亡、细胞内ADM浓度的变化和MRP1蛋白变化;分光光度仪测定细胞内还原性谷胱目肽(GsH)的含量;RT-PCR半定量检测PHI作用前后MRP1 mRNA的水平.结果显示,随着PHI浓度的增加,细胞生存率降低;两药联合应用时K562/A02细胞凋亡率均增加;当PHI≥20 μmol/L时其耐药倍数有显著差异(p<0.05),两种细胞内ADM浓度增加亦有显著差异(p<0.05).单独运用1 μg/ml ADM时K562/A02细胞内的GSH含量下降5%,单独运用PHI时K562/A02细胞内的GSH含量随着PHI浓度的增加先是轻度升高尔后下降,GSH含量下降点约在10 μmol/L;当PHI≥20 μmol/L与1 μg/mlADM联合应用时,K562/A02细胞内的GSH含量随着PHI浓度的升高而进行性下降;而不同浓度的PHI的作用前后.两种细胞的MRP1的表达无论是蛋白水平还是基因水平都无显著差异(P>0.05).结论:PHI对K562/A02细胞的细胞毒作用与细胞内GSH耗竭无直接关系,PHI不但可以增强K562/A02细胞对ADM的敏感性,而且通过耗竭细胞内GSH部分地逆转K562/A02细胞对ADM的耐药.联合使用PHI可减少ADM的用量,从而降低其毒副作用.