换一批
换一批硼替佐米对内皮细胞株HMEC-1 VEGF基因表达的影响及其机制探讨
Effect of Bortezomib on VEGF Gene Expression of Endothelial Cell Line HMEC-1 and Its Possible Mechanisms
摘要本研究探讨硼替佐米对内皮细胞株HMEC-1VEGF基因表达的影响,并检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)转录调节活性和膜联蛋白A2(Annexin A2)表达强度的变化以分析VEGF基因表达变化可能的机制.用细胞计数试剂盒CCK-8检测细胞的相对增殖活力;采用实时定量PCR检测VEGF基因表达强度,RT-PCR检测碳酸酐酶Ⅸ(CA Ⅸ)的基因表达强度,用实时定量PCR和Western blot分别检测Annexin A2在基因和蛋白水平的变化.结果表明:2.5、5.0、10 nmol/L硼替佐米作用12小时,内皮细胞株HMEC-1 VEGF基因表达强度分别为:0.730±0.106、0.673±0.153、0.767±0.090(0 nmol/L时为1.0)(p＜0.05);2.5、5.0 nmol/L药物未明显抑制细胞的增殖活力(p＞0.05),10 nmol/L时细胞增殖则明显被抑制(p=0.024),不同浓度硼替佐米处理后,CAⅨ基因表达强度均明显降低,HIF-1α转录调节活性受到抑制;Annexin A2蛋白的表达也明显受抑.结论:低剂量的硼替佐米对蛋白酶体活性无明显抑制作用;硼替佐米可能通过调节内皮细胞HIF-1α的活性和Annexin A2蛋白的表达下调VEGF基因的表达水平.
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