换一批
换一批人Jagged-1蛋白在真核细胞中的表达及稳定株的建立
Expression of Human Jagged-1 Protein on Eukaryotic Cells and Establishment of Stable Transfectant Cell Line
摘要Jagged-1蛋白属于Noah信号通路的配体之一,而Notch信号通路是介导细胞和细胞之间接触的主要信号通路之一,在造血微环境中调节造血细胞增殖与分化的过程中起重要作用.为研究Notch信号通路中受体与配体结合后的生物学功能及Notch信号通路在骨髓基质细胞影响细胞耐药的作用机制,构建过表达Jagged-1蛋白的NIH-3T3细胞株.构建含Jagged-1全编码区基因的pEGFP-IRES2-Jagged-1真核表达载体.结果表明,重组质粒转染哺乳动物细胞NIH-3T3后,Western blot分析证实转染后NIH-3T3细胞高效表达Jagged-1蛋白;经过选择性培养基筛选及有限稀释法挑取单克隆细胞后,流式细胞术(FCM)分析证实建立起过表达Jagged-1蛋白的单克隆细胞模型,即NIH-3T3-pEGFP-IRES2-Jagged-1细胞株.结论:本研究成功构建了Jagged-1真核表达栽体,并建立了稳定转染的单克隆细胞株.过表达Jagged-1蛋白的NIH-3T3单克隆细胞株的构建为我们研究骨髓基质细胞相关的细胞耐药的作用机制并为发现新的药物作用靶点提供条件.
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发布时间
2010-10-22
基金项目
中国医师协会临床医学科研专项资金--血液肿瘤临床研究资金资助项目
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