换一批
换一批人von Willebrand因子A1A2A3三联体结构域的真核表达及功能鉴定研究
Eukaryotic Expression of von Wiilebrand Factor A1A2A3 Triplet and Its Biological Activitiy
摘要本研究构建人血管性血友病因子A1A2A3区(vWF-A1A2A3)编码序列基因真核表达栽体并在CHO细胞表达,为探讨vWF-A1A2A3的生物学功能奠定基础.根据已公布的序列设计引物,用PCR方法从vWF cDNA中扩增出人vWF-A1A2A3编码序列基因片段(vWF-A1A2A3),测序正确后用限制性内切酶将目的片段插入pSectag2b载体中.酶切后通过脂质体介导转染至CHO细胞中进行表达.结果表明:重组质粒pSectag2b-vWFA1A2A3能在CHO细胞中表达,表达产物(rvWF-A1A2A3)能够与人Ⅲ型胶原结合和在瑞斯托霉素诱导下与血小板结合.结论:成功构建了rvWF-A1A2A3并表达于CHO细胞.本研究为vWF相关的生物学结构、功能研究和临床应用提供了基础.
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发布时间
2010-12-07
基金项目
国家自然科学基金
江苏省自然科学基金
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