5-氮杂胞苷可通过降低K562细胞miRNA-17-19b的表达抑制细胞增殖

5-Azacytidine Suppresses K562 Cell Line Proliferation by Down-regulation of miR-17-19b

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摘要本研究探讨miRNA-17-19b在不同细胞系的表达差异.用5-氮杂胞苷(5-aza)处理miRNA-17-19b表达水平相对较高的K562细胞系,观察其对miRNA-17-19b表达水平的影响.提取K562细胞系、HL-60细胞系、NB-4细胞系、HeLa细胞系、慢性髓系白血病(CML)病人外周血白细胞及动员后的正常人外周血白细胞总RNA,在多聚腺苷酸(ployA)加尾后进行逆转录,用荧光时实定量PCR的方法检测以上细胞miRNA-17-19b的相对表达水平.分别在24、48、72小时用2.5 μmol/L的5-氮杂胞苷处理K562细胞系,在96小时后收集细胞,用荧光时实定量PCR的方法检测处理前后miRNA-17-19b的表达水平变化.抑制miR-19a在K562细胞系的功能,观察其对K562细胞增殖的影响.结果表明:K562细胞系及CML病人外周血白细胞的miRNA-17-19b的表达水平高于动员后的正常人外周血白细胞.对miR-17-19b表达水平相对较高的K562细胞系,5-氮杂胞苷处理可降低其miRNA-17-19b表达水平,通过抑制miR-19a的功能可以抑制K562细胞系的增殖.结论:与正常人外周血白细胞相比较,miRNA-17-19b在K562细胞系及CML病人的外周血白细胞中的表达水平较高,5-氮杂胞苷可抑制miRNA-17-19b在K562细胞系的表达,其中对miR-19a影响尤其显著;体外抑制miRNA-19a的功能可抑制K562细胞系的增殖.