换一批
换一批利用siRNA靶向沉默Jeko-1细胞survivin mRNA 基因的实验研究
Silencing of Survivin Gene in Jeko-1 Cell Line with Small Interfering RNA
摘要本研究旨在探讨Survivin基因在淋巴瘤细胞中的生物学作用,为将来以Survivin为靶点治疗套细胞淋巴瘤提供实验室证据.体外化学合成针对survivin mRNA基因的siRNA片段,通过DMRIE-C转染Jeko-1细胞,以无关siRNA、未转染的细胞为对照,采用RT-PCR和Western blot方法检测siRNA的抑制效果,利用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用CCK-8法检测转染24、48、72 h对细胞增殖的影响.结果表明,与未转染的空白组相比,siRNA转染Jeko-1细胞后24、48、72 h survivin mRNA的相对表达量分别为0.49 ±0.03、0.38 ±0.02和0.17+0.02;细胞增殖抑制率分别为(31.2±2.1)％、(43.3±3.4)％和(52.6±2.5)％；细胞凋亡率分别为(6.3±0.5)％、(13.5±1.1)％和( 23.6±1.6)％；survivin蛋白表达水平逐步减低.结论:靶向survivin的siRNA能在体外特异性下调目的基因survivin mRNA和蛋白的表达,表现出抑制Jeko-1细胞增殖和促使其凋亡的生物学效应,survivin基因有望成为淋巴瘤治疗的一个药物靶点.
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