换一批TBLR1-RARα融合基因对K562细胞向红系分化的影响
Effect of TBLR1-RARα Fusion Gene on Erythroid Differentiation of K562 Cells
摘要目的:探讨融合基因TBLR1-RARα的表达对于白血病细胞系K562细胞向红系分化的作用及其可能的机制.方法:应用Tet-Off系统,通过强力霉素(doxycycline,Dox)调控TBLRl-RARα的条件性表达.将TBLR1-RARα融合基因与慢病毒目的载体pLVX-Tight-Puro连接,感染K562细胞并获得稳定克隆,Western blot证实TBLR1-RARα融合蛋白的表达情况.应用实时定量荧光PCR检测全反式维甲酸(all-trans retinoid acid,ATRA)处理的K562细胞红系分化的表面标志CD71以及α,ε,γ-珠蛋白的基因表达水平;流式细胞术(flow cytometry)分析细胞表面CD71和CD235a的表达情况,联苯胺染色观察血红蛋白的生成情况.结果:实时定量PCR显示,ATRA能够使这些细胞的红系分化相关的CD71及α,ε,γ-珠蛋白的基因表达水平上调;流式分析结果同样表明,ATRA促使红系分化早期标志CD71细胞所占比例增加.ATRA处理后,联苯胺染色证实这些细胞的胞浆出现蓝染,表明ATRA能够诱导表达TBLR1-RARα的K562细胞产生血红蛋白.结论:TBLR1-RARα融合基因表达,有利于ATRA诱导K562细胞向红系分化.
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关键词
TBLR1-RARα融合基因K562全反式维甲酸红系分化fusion geneTBLR1-RARαK562all-trans retinoid aciderythroid differentiation
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DOI
10.7534/j.issn.1009-2137.2015.06.032
发布时间
2016-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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