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LIF和bFGF对脐带间充质干细胞体外自我维持和更新的影响

Effects of Leukemia Inhibitory Factor Combined with Basic Fibroblast Growth Factor on Self-maintenance and Self-renewal of Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells In Vitro

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摘要目的:研究LIF联合bFGF对人脐带间充质干细胞hUC-MSC增殖、干性维持及衰老的影响.方法:实验分为4组:对照组,加入完全培养基(含10％ FBS的α-MEM)常规培养;LIF组,加入含10 ng/ml LIF的完全培养液;bFGF组,加入含10 ng/ml bFGF的完全培养液;联合组,加入含10 ng/ml LIF和10 ng/ml bFGF的完全培养液.采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)测定各组第4代hUC-MSC生长曲线;在倒置相差显微镜下观察各组hUC-MSC形态变化;β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老情况;RT-PCR检测表达情况.结果:4组细胞生长曲线均近似S形,细胞增殖速率表现为联合组＞ bFGF组＞LIF组＞对照组.对照组细胞较早出现衰老,增殖减慢;LIF组细胞早期形态维持较好,但增殖相对缓慢,后期大部分细胞衰老;bFGF组部分细胞呈衰老改变,但增殖较快;联合组细胞增殖迅速,能长期维持hUC-MSC形态特征,仅有少量衰老细胞.RT-PCR显示,LIF和bFGF均能上调PCNA、OCT4、NANOG,下调P16、P21、P53的表达,其联合作用效果更明显.结论:LIF联合bFGF不仅可以促进hUC-MSC增殖,维持其干性,而且能够延缓hUC-MSC的衰老.

作者胡文龙 ^[1] 吴平平 ^[2] 殷嫦嫦 ^[3] 施剑明 ^[4] 殷明 ^[5] 学术成果认领

作者单位南昌大学研究生院医学部,江西南昌330006;南昌大学第二附属医院骨科,江西南昌330006;九江学院基础医学院,江西九江332000 ^[1] 南昌大学研究生院医学部,江西南昌,330006 ^[2] 九江学院基础医学院,江西九江,332000 ^[3] 南昌大学研究生院医学部,江西南昌330006;南昌大学第二附属医院骨科,江西南昌330006 ^[4] 南昌大学第二附属医院骨科,江西南昌,330006 ^[5]

关键词 hUC-MSC LIF bFGF 自我更新自我维持 human umbilical cord mesenchymal stem cell leukemia inhibitory factor basic fibroblast growth factor self-renewal self maintenance

医学主题词自我(Ego)脐带(Umbilical Cord)间质干细胞(Mesenchymal Stem Cells)衰老(Aging)细胞(Cells)

分类号 R329.28（基础医学人体形态学）

栏目名称

间充质干细胞

DOI 10.7534/j.issn.1009-2137.2016.01.035

发布时间 2016-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（81160226）