白藜芦醇逆转急性髓系白血病细胞HL-60/ADR耐药的凋亡机制
Mechanism of Apoptosis for Resveratrol-mediated Reversing the Drug-resistance of AML HL-60/ADR cells
摘要目的:探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)逆转急性髓系白血病细胞HL-60/ADR耐药的凋亡机制.方法:将HL,60/ADR细胞分为对照组(Control)、阿霉素(ADR)处理组、Res处理组和ADR+ Res联合处理组4组.应用CCK-8法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞内阿霉素(ADR)自发荧光强度和细胞凋亡率;RT-PCR法检测耐药基因MRP1、抗凋亡基因BCL-2和促凋亡基因BAX mRNA表达水平,Western blot法测定MRP1、BCL-2和BAX蛋白表达水平.结果:25、50、100和200 μmol/L Res作用于HL-60/ADR细胞48 h后,细胞的最大抑制率分别为44%、61%、76%和81%,呈浓度依赖性(r=0.876,P<0.05);与ADR组的半数抑制浓度(IC50)(8.534±1.111 μmol/L)相比,ADR+ Res组HL-60/ADR细胞的IC50(1.591±0.373 μmol/L)明显减少(P<0.05).ADR联合Res后HL-60/ADR耐药细胞内ADR自发荧光强度明显增加(P<0.05);Res组和ADR+ Res组细胞凋亡率均显著增加(P<0.05).Res组和ADR+ Res组的MRP1 mRNA、BCL-2 mRNA表达水平显著下降(P<0.05),BAXmRNA表达水平明显上升(P<0.05).Res组和ADR+ Res组MRP1、BCL-2蛋白表达水平显著下降(P<0.05),BAX蛋白明显上升(P<0.05).结论:白藜芦醇具有逆转HL-60/ADR细胞耐药的作用,可能是通过促进HL-60/ADR细胞凋亡、抑制耐药蛋白MRP1而发挥作用,其促凋亡机制与抑制BCL-2和增强BAX表达有关.
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