换一批多发性骨髓瘤细胞中胰岛素样生长因子结合蛋白7的基因表达及甲基化调控
Expression of Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 7 Gene in Multiple Myeloma Cell Line and Methylation Regulation
摘要目的:研究多发性骨髓瘤细胞株U266中胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)的表达及甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-dc)对其增殖的影响.方法:体外培养多发性骨髓瘤细胞株U266,并以健康查体者的骨髓单个核细胞(N-BMMNC)作为正常对照,提取RNA,采用实时RT-PCR检测IGFBP7的表达,提取细胞DNA甲基化修饰后采用甲基化特异性PCR (MSP)分析其CpG岛的甲基化状态,不同浓度的甲基转移酶抑制剂5-aza-dc(5、10和20 μmol/L)处理U266细胞株,在48 h收集细胞,用实时RT-PCR和蛋白印迹法检测各组IGFBP7 mRNA和蛋白表达,流式细胞术检测药物处理前后各组细胞的细胞凋亡及细胞周期.结果:U266细胞IGFBP7 mRNA表达较正常骨髓细胞降低;MSP检测显示U266 IGFBP7的启动子CpG岛明显甲基化;不同浓度的5-aza-dc处理U266细胞株48 h后,IGFBP7的mRNA表达呈剂量依赖性增高(r=0.952,P＜0.05),IGFBP7蛋白表达呈剂量依赖性增高(r=0.983,P＜0.05);随着药物浓度增高,U266在G0/G1期细胞逐渐增多(r=0.966),细胞凋亡率逐渐增加(r=0.958).结论:U266细胞中IGFBP7 mRNA较N-BMMNC低表达,与CpG岛的异常甲基化相关,5-aza-dc可以使U266细胞中IGFBP7 mRNA和蛋白表达恢复,并通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡发挥其对U266细胞的生长抑制作用.
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关键词
胰岛素样生长因子结合蛋白7多发性骨髓瘤U266细胞株5-氮杂-2'-脱氧胞苷insulin-like growth factor binding protein 7multiple myeloma cell line U2665-aza-2'-deoxycytidine
栏目名称
DOI
10.7534/j.issn.1009-2137.2017.03.032
发布时间
2017-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
山西省卫生计生委科研项目（2015041）
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