首页 > 中国实验血液学杂志 > MiR-30b通过靶向CCL22调控人NK/T细胞淋巴瘤细胞株SNK-6和YTS顺铂耐受的研究

MiR-30b通过靶向CCL22调控人NK/T细胞淋巴瘤细胞株SNK-6和YTS顺铂耐受的研究

MiR-306 Regulates the Cisplatin-Resistance of Human NK/T Cell Lypnphoma Cell Lines SNK-6 and YTS by Targeting the CCL22

二维码有效期 120s

摘要目的:探讨miR-30b对人NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL) SNK-6和YTS细胞对顺铂耐受的调控及其作用机制.方法:培养正常NK细胞以及SNK-6和YTS细胞,应用real-time PCR法和Western blot分别检测miR-30b和巨噬细胞来源的趋化因子(CCL22) mRNA和蛋白的表达.以miR-30b过表达和miR-30b抑制剂分别转染SNK-6和YTS细胞,MTT法检测SNK-6和YTS细胞对顺铂耐受性的影响;caspase-3试剂盒检测caspase-3活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平.双荧光素酶报告基因检测miR-30b与CCL22的靶向关系.Western blot法检测CCL22表达,评估CCL22对细胞耐受性和caspase-3活性的影响.结果:与正常NK细胞相比,SNK-6和YTS细胞中miR-30b表达均显著降低(P＜0.01),CCL22 mRNA表达均显著升高(P＜0.01).miR-30b过表达可降低细胞活性,顺铂耐受性显著降低(P＜0.05),细胞凋亡比例显著增高(P＜ 0.05),Caspase-3活性增加(P＜0.05).miR-30b抑制剂作用与miR-30b过表达作用相反.荧光素酶活性分析显示,miR-30b过表达显著降低荧光素酶报告基因的荧光强度,而结合位点突变后荧光素酶活性不变,表明CCL22是miR-30b的直接靶分子.此外,miR-30b过表达显著降低CCL22表达(P＜0.05).而CCL22过表达可增加SNK-6细胞活性,降低Caspase-3活性,逆转miR-30b的作用,增加对顺铂的耐受性.结论:miR-30b可通过靶向CCL22抑制人NKTCL SNK-6和YTS细胞的顺铂耐受性.