有丝分裂调控蛋白DIS3的表达调控对3株人骨髓瘤细胞增殖能力的影响

Effect of Expression Regulation of Mitotic Control Protein DIS3 on Proliferation of 3 Cell Lines of Human Myeloma

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摘要目的:探究有丝分裂调控蛋白DIS3的表达调控对3株人骨髓瘤细胞增殖能力的影响.方法:选取人骨髓瘤细胞株NCI-H929、RPMI 8226和U266B1为研究对象,分别设计并构建DIS3基因过表达载体和DIS3-siRNA.细胞实验分为对照组、DIS3过表达-空载体组、DIS3-siRNA阴性对照组、DIS3过表达组以及DIS3-siRNA组共5组.细胞培养24、48和72 h后,应用MTT法检测3种细胞株的增殖能力;收集培养了72 h的细胞样本,应用RT-qPCR和Western blot分别检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达变化.结果:MTT检测显示,与同时间点(24、48或72 h)DIS3过表达-空载体组比较,DIS3过表达组细胞增殖能力显著降低(P＜ 0.05;P＜0.01);与同时间点(24、48或72 h)DIS3-siRNA阴性对照组比较,DIS3-siRNA组细胞增殖能力均显著增加(P＜0.01).qRT-PCR和Western blot检测显示,与DIS3过表达-空载体组比较,DIS3过表达组细胞中PCNA的mRNA及蛋白表达量均显著降低(P＜0.01);而与DIS3-siRNA阴性对照组比较,DIS3-siRNA组细胞中PCNA的mRNA及蛋白表达量均显著升高(P＜0.01).结论:过表达DIS3能显著降低3株人骨髓瘤细胞的增殖能力,这可能与降低PCNA的表达密切相关.