CpG-寡核苷酸免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病遗传学研究中的应用
Application of CpG Oligodeoxynucleotide Immunostimulation in Chromosome Study of Chronic Lymphoblastic Leukemia
摘要目的:探索CpG-寡核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)细胞染色体培养中的价值,对比国内外相关研究的差异,进一步提高CLL核型培养成功率及异常核型检出率.方法:收集82例CLL患者的骨髓标本,分别应用植物血凝素(PHA)、CpG-寡核苷酸联合白介素-2(CpG-ODN DSP30+ IL-2)刺激培养72 h后收获细胞,制备染色体,进行常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)分析.同时应用D13S25、Rb1、ATM、p53和CSP12探针进行间期荧光原位杂交(interphase fluorescence in situ hybridization,iFISH)检测.比较2种细胞刺激剂进行染色体培养及iFISH检测结果的差异性.结果:PHA与CpG-ODN DSP30+ IL-2 2种免疫刺激法核型培养成功率(可分析分裂相t≥20个)分别为90.2%(74例)和68.3%(56例),异常核型检出率分别为13.5%(10例)和46.4%(26例).PHA组核型培养成功率显著高于CpG-ODN DSP30+ IL-2组(P=0.01),而CpG-ODN DSP30+ IL-2组异常核型检出率显著高于PHA组(P =0.003).iFISH异常核型检出率(74.4%,61例)显著高于CpG-ODN DSP30+ IL-2组(P=0.000).iFISH检测能验证CC分析检出的异常.结论:应用CpG-ODN DSP30+ IL-2免疫刺激法培养CLL细胞,可提高异常核型检出率,特别是能检出提示预后差的各种易位.
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