β-arrestin1通过miR-652-5p促进T-ALL细胞线粒体活性氧含量的研究

β-arrestin1 Promotes the Concentration of Mitochondrial Reactive Oxygen in T-ALL Cells via MiR-652-5p

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摘要目的:探讨β-arrestin1对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞线粒体内活性氧含量(ROS)的影响及可能作用机制.方法:构建稳定敲低β-arrestin1(Siβ1)的T-ALL细胞株Jurkat细胞.采用流式细胞术、探针法分别检测细胞及线粒体内ROS含量.microRNA芯片检测及分析和Q-PCR验证β-arrestin1与microRNA的关系.miRbase软件预测microRNA靶基因,Western blot检测microRNA靶基因表达,双荧光素酶报告基因实验验证结合.结果:成功构建Jurkat Siβ1稳定细胞株,Jurkat Siβ1整个细胞水平ROS含量略降低,且线粒体内ROS含量明显降低.mi-croRNA芯片分析发现,多种与T-ALL相关的microRNA呈差异表达,其中miR-652-5p在Jurkat Siβ1中的表达显著升高(P ＜0.05 fold ＞2.0),且Q-PCR显示miR-652-5p在Jurkat Siβ1中上升近5倍;通过miRbase软件预测到P62基因是miR-652-5p靶基因,且其能调控线粒体功能,在miR-652-5p稳定敲低Jurkat细胞中高表达,双荧光素酶报告基因实验证实P62是miR-652-5p靶基因.结论:T-ALL中,β-arrestin1可降低miR-652-5p表达,解除对P62基因的抑制,增加细胞线粒体内ROS含量.