换一批摘要目的:探讨影响血浆凝块收缩功能的关键因素,优化血浆凝块收缩功能实验方法,以用于研究血小板功能调控和评价药物对血浆凝块收缩功能的调节作用.方法:依次研究不同浓度的凝血酶、Ca2+以及血小板对血浆凝块收缩率的影响,优化血浆凝块收缩检测体系.通过检测多种血小板信号通路抑制剂对血浆凝块收缩的调节作用验证该检测体系的有效性.结果:通过对凝血酶浓度、Ca2+浓度和血小板浓度的优化研究,利用0.2 U/ml凝血酶处理含0.5 mmol/L Ca2+以及40×109/L血小板的富血小板血浆(PRP)进行血浆凝块收缩分析.在此条件下,凝血酶处理15 min能够显著诱导血浆凝块收缩反应,处理30 min诱导的血浆凝块收缩率大于50％.利用此检测条件研究抑制剂对血浆凝块收缩的调节作用,PKC抑制剂Go 6983能够强烈抑制血浆凝块收缩反应,PI3K抑制剂Ly294002和p38 MAPK抑制剂SB203580能够轻度抑制血浆凝块收缩反应.结论:利用0.2 U/ml凝血酶处理含0.5 mmol/L Ca2+和40×109/L血小板的PRP进行血浆凝块收缩检测,可以用于研究血小板功能调控和评价药物对血浆凝块收缩的调节作用.
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